花卉模板(花卉病毒类似病害的诊断和鉴定方法有哪些)

植原体、螺原体等无壁菌门的原核生物造成的植物病害与植物病毒产生的症状相似，无病症表现，因此，它们又叫病毒类似病害。花卉上比较常见的是植原体病害，因此我们介绍一下植原体病害的诊断和鉴定。

1 超薄切片，电镜下观察植原体

方法如植物病毒的超薄切片和电镜观察。

2 抗生素治疗诊断

用四环素、土霉素和金霉素等对受病植株进行叶面喷施和灌根，植原体对这几种抗生素敏感，病害症状可以得到缓解。而植物病毒对抗生素不敏感，如果施用，对病害无效。

3 植原体PCR检测

根据植原体的共同保守序列，用植原体16S rRNA基因通用引物R16mRl/R16mF2进行植原体直接PCR扩增，可扩增到植原体的特异扩增带。

还可以将直接PCR产物分别稀释40倍后，引物换为R16R2/R16F2进行巢式PCR扩增，可得到与引物设计相符的植原体的特异扩增带，说明为植原体病害。

这里以仙人掌植原体丛枝病的PCR检测为例，介绍植原体的PCR检测技术。

实验操作如下：

Ⅰ.总核酸提取

（1）取0.3g植株幼嫩组织，用液氮冷冻后充分研磨成粉状。

（2）移入含有0.6ml预热到60℃的CTAB DNA提取缓冲液中，在60℃水浴中温浴30min。

（3）加入等体积酚∶氯仿∶异戊醇（25∶24∶1），抽提30min。

（4）12000r/min离心8min，取上清液，重复（3）、（4）步直至蛋白质除尽。

（5）加入氯仿∶异戊醇（24∶1），抽提30min，12000r/min离心8min，取上清液。

（6）加入等体积预冷的异丙醇及1/10体积的醋酸钠（3mol/L，pH5.2），混匀，-20℃保持至少30min，14000r/min离心10min，使核酸沉淀。

（7）用70%乙醇洗涤2次后，.真空干燥。

（8）沉淀溶解于100μl TE缓冲液中。

（9）取10μl DNA经0.7%琼脂糖凝胶电泳后观察结果，计算DNA浓度。其余于-20℃冰箱中保存备用。

Ⅱ.PCR扩增

参照Lee所报道的植原体16S rRNA基因通用引物对R16mF2/R16mRl序列和R16F2/R16R2序列合成引物，引物序列如下：

R16mF2：5′-CATGCAAGTCGAACGGA-3′

R16mRl：5′-CTTAACCCCAATCATCGAC-3′

R16F2：5′-ACGACTGCTGCTAAGACTGG-3′

R16R2：5′-TGACGGGCGGTGTGTACAAACCCCG-3′

引物溶解于适量灭菌水中至终浓度为10μmol/L。

直接PCR（Direct-PCR）：

（1）取一PCR薄壁管，依次加入下列试剂

10×PCR反应缓冲液 5μl

5mmol/L MgCl2 4μl

2.5mmol/L dNTP 4μl

R16mF2（或R16F2） 3μl

R16mRl（或R16R2） 3μl

4U/μl 1TaqDNA聚合酶 1μl

模板 2μl

加入双蒸水至终体积为50μl，混匀并加入30μl石蜡油。

（2）PCR扩增。反应循环为95℃预变性5min；95℃变性30s，55℃退火1min，72℃延伸90s，35个循环后于72℃保温10min，4℃冰箱中保存。

（3）取5μl PCR产物于1%琼脂糖凝胶检测PCR扩增结果。

巢式PCR（Nested-PCR）：

将用引物对R16mF2/R16mRl扩增的直接PCR产物按1∶40比例稀释后，作为反应模板，引物对换为R16F2/R16R2，退火温度升高至60℃，其余反应条件同直接PCR。

Ⅲ.结果

用植原体16S rRNA基因通用引物R16mRl/R16mF2进行植原体直接PCR扩增，可扩增到一条约1.5kb的特异扩增带（图1）。通过实验，用泡桐丛枝作为植原体的阳性对照，检测出YNOl样品（仙人掌品种珊瑚枝丛枝）和YNO2（仙人掌品种堆罗汉丛枝）为植原体病害。其他YNO3（仙人掌品种猪耳掌丛枝）、YNO4（仙人掌品种金狮子丛枝病）、YNO5（仙人掌品种青海波丛枝）不是植原体病害，可能为品种的特性。

图1 直接PCR扩增结果

将直接PCR产物分别稀释40倍后，引物换为R16R2/R16F2进行巢式PCR扩增，可得到一条约1.2kb的特异条带，与引物设计相符（图2），说明为植原体病害。直接PCR的检测灵敏度为10pg DNA，而巢式PCR可以提高检测灵敏度。使用直接PCR的检测得到比较模糊条带的，使用巢式PCR可以得到非常明显的条带。

图2 巢式PCR扩增结果

新手如何用ps做海报1.直接用字体作为主要元素通过改变字体的大小、排版来起到吸引目光的效果，下面这个海报的视觉幻象可以让观众看两遍海报上的内容。你可以凭想象从头设计，也可以参照别的图，下面这幅图就是参照视力检测表设计的。2.极简主义每一个设计工作室或者机构里面都会挂一副极简主义风格的海报，通常是白色和黑色的组合，既精致又赏心悦目。设计一副极简风格的海报并不难，最简单的方法是，利用Fotor在线设计工具_免费设计素材和模板_在线平面设计网站的模板来快速打你的极简海报。3.形状形状是设计插画和海报中的重要的元素。下面这张海报中，几个形状合在一起就成了一副钟表的样子。现代感、科技感的形状很适合用来做海报的背景。你可以选择任意的形状，甚至可以是抽象的形状，去发挥你的创造力吧。4.添加风格化的插画如果你不知道用什么图做背景图，风格化的插画是一个不错的选择。制作成什么风格随你决定，选择有趣的图形和颜色，可以营造出一种设计的趣味性。5.运用色彩覆盖如果你选择使用画质不是特别好的作为背景，色彩覆盖的效果能帮你遮掩一下。覆盖了一层粉色，下图里的甘地看上去就好多了。如果你不是一个专业的设计师，不会使用色彩覆盖，用一个有颜色的滤镜就可以了。色彩叠加同时也是设计中一个重要的元素，可以改变设计的整体风格。6.用花点亮画面也不是什么花都可以。花和颜色一样，都是有意义的。参照花卉学，或者花语，选择契合你要表达的主题的花。花卉元素可以使你的海报背景变得梦幻。7.让设计元素和字体融为一体让你设计中使用的元素和字体有层次地缠绕、堆叠在一起，就能产生这样奇妙的效果。同时，像下面展示的海报一样，它还会创造一个奇妙的立体感。我们都看过不少运用多层次的鲜花、水果甚至芭蕾舞蹈来创造深度的幻象。在Fotor的素材库里，相信你能找到合适的模板。8.复古风人们都热爱有年代感的东西，尤其是在设计创作的时候，复古风已经盛行了很长时间了。复古风不单单是指海报给人的感觉，也可以在海报中使用复古的影像。9.幻觉制造我们强调过许多次海报背景的重要性。如果背景和海报内容能够结合在一起，整张海报就会充满活力和趣味。就像上面这张Doaly的海报一样。10.强调色强调色能直接的吸引观众的眼球，直接突出图中的重点，或是为海报增加一些可爱的小细节。就像下面这海报一样。11.复古字体复古的字体是灵感的伟大来源，他们的复杂的细节和堆叠的类型至今仍让人惊叹不已，下图的海报就包括了大量的复古元素。12.碎片化设计上图他们增加了形式和视觉兴趣的词“destruction”。虽然碎片的字体已经足具冲击力，但是红色的“o”更是完美的收官之笔。锋利的、轮廓分明的边缘也适用于其他地方，它们特别适合背景。13.粗体字字体是设计中非常重要的部分，但当我试着模仿耐克海报的线条设计时却总是失败。它不仅因大胆而伟大，而且该系列有32条无衬线，该系列的丰富性使得它可以被灵活的运用。但其实这张海报，我最喜欢的方面不是粗体文本而是大胆的红色元素，经典的红色丝带似乎在为我们指引终点线。14.深色背景和明亮字体使用粗体字，使人能完全地感受到海报所想表达的情感。Insando在这张图中的创作很好的诠释了这样使用深色背景和明亮字体的海报类型。纹理和高对比度也可以帮助传达感情。在我们的模板中，我们已经将表情字体和纹理设计元素进行了搭配，为了确保我们的内容不会在黑暗的背景丢失，我们选了一个明亮的颜色。15.善用文字框将您的内容放在一个中等重量框架内，它和沉重的字体间距将帮助您创造一个现代的感觉，正如上面的海报的所呈现出的感觉。添加框线可以保持画面的平衡感，而平衡感是确保整体效果的关键。如何制作海报想学简单的PS

用PS制作简单的彩色文字人像海报，具体步骤如下：

1、首先打开Photoshop,将人物肖像图导入。一般情况下，会对导入的图像进行润饰，令图像的光暗和色彩效果更加鲜艳。这里，选择“图像、调整、亮度/对比度”,将亮度和对比度调高。

2、执行菜单“选择、色彩范围”,选择暗调。

3、将图像阴影部分选择后，按“Ctrl+J”复制阴影部分到新图层，选择回原来的人物肖像图层，再执行“选择、色彩范围”,这次选择中间调。

4、选定中间调的范围后，按“Ctrl+J”复制到新图层。

5、选择魔棒工具，在原始人物肖像图层中，选择蓝色帽子和头发的高光部分。然后按“Ctrl+J”将刚才选择的部分复制到新图层。蓝色帽子和头发的高光部分是人物最重要的特征，刚才的暗调和中间调都没有选择上，这里补充上。

6、基本图层搞掂后，将中间调图层和头发、帽子合并为一个图层，命名为“中间调”.暗调则命名为“暗调”.取消原始肖像图层的显示。

7、肖像组合完成，开始印刷效果制作。按“Ctrl+N”新建一个画布，宽高设置为11英寸*17英寸，分辨300,这样就能保证打印的精度。教程制作的印刷效果不仅可以用于这次的海报制作，还可以用在明信片和单词卡中。

8、将刚才的中间调图层和暗调图层粘贴到新画布中，一起选中两个图层，按“Ctrl+T”调出自由变换菜单，再按着Shift按比例缩小图层。

9、选择刚才调整的暗调图层，执行“编辑、填充”,使用黑色，改变混合模式为正常，不透明度100%,勾选保留透明区域，同样对中间调图层填充，颜色选择50%灰色。

10、完成上面两次填充后，两个图层的效果。

11、选择中间调和暗调两个图层，按右键选择合并图层。制作印刷效果的笔刷。新建画布，宽高设置得大一点，但分辨率就默认。选择文字工具，在不同的图层输入，调整它们的大小和字体使它们各不相同，然后设置文字的颜色为黑色。

12、选择全部的文字图层，按右键选择格栅化，将文字由可编辑状态转变为像素图像，即是不能再编辑，所以要确保文字的大小字体符合你的要求。将格栅化文字图层制作成笔刷。将文字图层关闭不显示，只留下一个。执行“编辑、自定义笔刷”,按需要命名笔刷。

13、如此类推，其他的文字图层照样设置为笔刷，在设置的时候注意只保留一个文字图层显示出来。设置完成后，可以从画笔预设中找到刚才保存的笔刷样式。

14、笔刷设置好后，再来制作海报设计。选择画笔工具，按“F5”调出画笔设置菜单。选择一个文字笔刷，勾选调整画笔笔尖形状，设置直径220像素、角度0°、间距494%.直径、角度、间距可以根据需要进行调整。

15、设置好笔画类型和参数，按“Ctrl+Shift+N”新建一个图层，然后按自己喜好在图层上绘画出各样的随机文字。

16、再用其他的笔画如下图将脸部填满。绘画过程中不用担心会涂画过了，下面会进行相应的修改。对脸部五官等比较细微的位置，需要调小笔刷直径，细致沿原肖像勾勒五官。经过调整修改后。

17、到这一步，有点像模像样了。继续按“Ctrl+Shift+N”新建一个图层，用油漆桶工具填充白色，然后将白色图层移到笔刷图层和中间-暗调图层中间，关闭文字笔刷图层和白色图层（关键），单击选中中间-暗调图层，按“Ctrl+A”选择整个画布，再按“Ctrl+C”复制当前选定区域。

18、将刚才关闭的文字笔刷图层和白色图层显示出来，选择文字笔刷图层然后点击图层面板中的小按钮添加图层蒙版。按着“Alt”不放，点击图层蒙版的缩略图，这时画布变白，再按“Ctrl+V”将中间-暗调图层复制的区域粘贴。

19、按“Ctrl+D”取消当前选择，再按“Ctrl+I”反选，点击文字笔刷图层的缩略图，你就可以看到一个文字印刷效果的肖像。

20、下面就要为人物肖像上色啦！首先双击文字印刷图层，在图层样式中勾选渐变叠加，将渐变颜色设置为3-5种你喜欢的颜色，选择好颜色，按确定，漂亮的海报设计效果出来啦。

电脑怎么制作海报问题一：怎样用电脑制作海报打印方式是一个问题但最重要的是处理你的原本有多大呢~？举例子说，电脑桌面1024*768分辨律为72的壁纸，在实际打印中的尺寸约为8.6cm*6.5cm如果要打印，必须在分辨律300的状态下保证的尺寸为打印原大小我想，一般人的电脑中很少有那么大的原大小如果是喷绘海报，那么只要在66%的显示下还较清楚就可以了在photoshop中调整大小后，进行处理，比如调整色阶、饱和度太小，放大后有了噪点，就要用模糊工具等祛除噪点如果过小，放大了已经有很多马赛克了，那就放弃这张吧~问题二：如何用电脑制作海报打印方式是一个问题但最重要的是处理你的原本有多大呢~？举例子说，电脑桌面1024*768分辨律为72的壁纸，在实际打印中的尺寸约为8.6cm*6.5cm如果要打印，必须在分辨律300的状态下保证的尺寸为打印原大小我想，一般人的电脑中很少有那么大的原大小如果是喷绘海报，那么只要在66%的显示下还较清楚就可以了在photoshop中调整大小后，进行处理，比如调整色阶、饱和度太小，放大后有了噪点，就要用模糊工具等祛除噪点如果过小，放大了已经有很多马赛克了，那就放弃这张吧~用word可以制作，去网上下载PS也可以问题三：如何用电脑制作宣传海报用ps就可以实现。说不定我可以帮你hi我问题四：电脑怎样制作海报？ps问题五：怎么自己制作海报？手绘海报的话，用水彩笔、彩色马克都是蛮好的，市面上有手绘POP海报的教材，可以去看看。如果使用电脑制作，点阵图最好的软件就是Photoshop了，矢量绘图最好用illustrator和coreldraw。如果以上皆不会，可以上一些个性印品定制网站上传照片直接下单制作。如缤纷乐网站可以根据自己的需要取舍。问题六：用电脑怎么做宣传海报？你是准备用什么软件做呢？一般海报创意成份较强。建议可以用PS。制作的时候，看你是为哪一类客户制作的。你软件应该会用吗？还是一点都不会？我是当你会了说了啊。海报整体性要强，可以用大版图，或者是全版图去设计这个海报。说白了就是整个版面，占的成份多。因为这样吸引人。你要是实在不会了，可以去百度一下，看相关的海报怎么做。海报除了要大气以外，主题性的文字一定要明显。比如说XXXX。意思是说一眼看上去，要视觉冲击力强。咋强呢？就是刚说的，你主题文字明显。还有版面不要太乱。好就说到这儿吧。不知道你情况主要是。问题七：怎样把电脑照片的做成海报？技术搞的话，自己用photoshop做，不会的话去下光影魔术手，里面的组处功能理就有海报纸质功能，你只要按下一步就可以了问题八：用电脑怎么做宣传海报？看你做什么样的海报，简单的可以用OFFICE办公软件，复杂的就得用PS之类的专业软件问题九：电脑上弄海报用什么软件做？上“爱的影集”网站啊，不单是海报模板，相册模板，还有台历，挂历模板，通通免费~，最好的是模板可以任意改变，不会还有客服教你，呵呵，制作就更便宜了，一张A4大的，无论是冲印相纸，还是数码印刷，都只要4.9元，划算吧~不过考虑到有运费，肯定要做多几张更好问题十：如何在电脑上做海报？当然用PS做啦,PS中的字体样式和图形都能更好地处理!具体怎么操作,呵呵,巧汉难为无米之炊!